La evaluación morfológica de los músculos respiratorios puede verse alterada por la contracción muscular posterior a la toma de biopsias. No obstante, la mayoría de trabajos de morfometría de los músculos respiratorios se han realizado sin tener en cuenta este factor. La utilización de sustancias relajantes durante el procesamiento de las muestras puede disminuir este artefacto. El objetivo fue evaluar los cambios inducidos por una sustancia relajante en el análisis morfométrico de las fibras musculares. Método: Se evaluaron 31 muestras musculares procedentes de 7 pacientes. Inmediatamente después de su extracción, cada pieza fue dividida en dos porciones. Una fue transportada en una solución fisiológica isotónica, y la otra en una solución de curare al 0,02%. Posteriormente, ambas muestras fueron procesadas para el estudio morfométrico mediante tinción de ATPasa, NADTH y PAS. El análisis morfológico de los diferentes tipos de fibras incluyó la valoración del diámetro mínimo (Dmin), índices de atrofia (IA) e hipertrofia (IH) y la heterogeneidad de la distribución (SDDmin). Resultados: El Dmin de las fibras transportadas en solución de curare fue menor que el de las transportadas en solución fisiológica (67±2 pm frente a 71±2 pm, p<0,05). Lo mismo sucedió con la SDDmin (13±3 frente a 12±3, p<0,05) y el IH (300±88 frente a 457±107, p<0,05). Asimismo, se observó una correlación directa entre el tamaño de las fibras procesadas con solución fisiológica y el de las procesadas con solución de curare (Dmin, r=0,731, p<0,001; IH, r=0,827, p<0,001; SDDmin, r=0,636, p<0,0001). Conclusión: La utilización de sustancias relajantes en el procesamiento de muestras musculares consigue evitar el artefacto de contracción y debiera utilizarse sistemáticamente en el análisis morfológico de las fibras musculares. Dado que los valores de referencia han sido obtenidos fundamentalmente de cadáveres, los trabajos in vivo deben tener en cuenta este factor.
The morphological examination of respiratory muscle can be affected by muscular contraction following biopsy. Most morphometric studies of respiratory muscles, however, have been carried out without taking into account this factor, the effect of which can be reduced by using relaxants when taking samples. Objective. To examine the effect of using a relaxant in the morphometric analysis of muscle fibers.
We examined 31 muscle samples from 7 patients. Immediately after removal, each piece was divided in half. One was placed in an isotonic physiological solution and the other in a solution of curare 0.02%. Later, both samples were processed for morphometric study with ATP-ase, NADTH and PAS tincture. Morphological data recorded for the different types of fibers included measurement of minimum diameter (Dmin), atrophy and hypertrophy indices (AI and HI) and heterogenecity of distribution (SDDmin).
The Dmin was smaller in fibers transported in a curare solution than in those transported in physiological solution (67±2 pm vs. 71±|xm, p<0.05). The same was true of SDDmin (13±3 vs. 12±3, p<0.05), HI (300±88 vs. 457±107, p<0.05). Likewise, we found a similar direct correlation between size of fibers processed with physiological solution and those processed in curare (Dmin, r=0.731, p<0.001; HI, r=0.827, p<0.001; SDDmin, r=0.636, p<0.0001).
The use of relaxants in Processing muscle samples prevents contraction and should be used systematically in the morphological analysis of muscle fibers. Given that reference values have been obtained mainly from cadavers, in viro studies should be performed with this difference in mind.
